ملټي پلیکس یو ګام RT-qPCR Premix-UNG
بلی نمبر: HCB5145A
ملټي پلیکس یو سټیپ RT-qPCR پروب کټ (UDG Plus) د ملټي پلیکس کمیتي PCR کټ دی چې د آر این ای پراساس د ټیمپلیټ په توګه دی.د تجربې په بهیر کې، ریورس لیږد او کمیتي PCR په ورته ټیوب کې ترسره شوي، کوم چې تجربه عملیات ساده کړي او د ککړتیا خطر یې کم کړی.په دې کټ کې، لومړی سټینډ cDNA په اغیزمنه توګه د تودوخې مقاومت لرونکي ریورس ټرانسکریپټیس لخوا ترکیب شوی او د HotStart Tag DNA Polymerase لخوا په کمیتي توګه پراخ شوی.کټ کې په عمده توګه د مطلوب MP بفر، انزایمونو مکس، او نور شامل دي. د بفر محلول لا دمخه Mg لري2+او dNTP.سربیره پردې ، هغه فاکتورونه چې کولی شي په مؤثره توګه د غیر مشخص PCR امپلیفیکیشن مخه ونیسي او د ډیری qPCR تعاملاتو د لوړولو موثریت ته وده ورکړي اضافه شوي ، کوم چې کولی شي د لوړولو موثریت یقیني کړي او تر څو پورې تعاملات ترسره کړي.د dUTP/UDG سیسټم اضافه شوی ترڅو په مؤثره توګه د ایروسول ککړتیا خطر مخه ونیسي.
اجزا
1. بفر
2. د انزایم مخلوط
مشخصات
| ګرم پیل | جوړ شوی ګرم پیل |
| د کشف طریقه | د پرائمر-تحقیق کشف |
| د PCR طریقه | یو ګام RT-qPCR |
| پولیمیریز | Taq DNA پولیمیریز |
| د نمونې ډول | DNA |
د ذخیره کولو شرایط
محصول د وچ یخ سره لیږدول کیږي او د 1 کال لپاره -25~-15℃ کې زیرمه کیدی شي.دا باید په مکرر ډول ډډه وکړيکنګل کولدا سپارښتنه کیږي چې په جلا توګه خوندي کړئ.
لارښوونې
1.غبرګون سیسټم
| اجزا | حجم (μL) | وروستی تمرکز |
| 2 × MP بفر | 12.5 | ۱× |
| د انزایم مخلوط | 1 | - |
| پرائمر/ پروب مکس (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| کينډۍ RNA | 1-10 | - |
| RNase وړیا H2O | تر 25 پورې | - |
یادونه:
ډاډ ترلاسه کړئ چې د کارولو دمخه ښه مخلوط کړئ، د تاو تریخوالي کمپن له امله د ډیرو بلبلونو څخه مخنیوی وکړئ.
a.د پریمر غلظت: د پرائمر مخلوط د ملټي پلیکس پریمر په شمول، د وضعیت په پام کې نیولو سره د پریمر غوره غلظت ممکن د 0.l او 1.0μM ترمنځ وي.
ب.د تحقیقاتو غلظت: د پروب مکس په شمول د ملټي پلیکس پروب لیبل کولو توپیر فلوروسینټ ګروپ، د وضعیت په پام کې نیولو سره د احتمالي تحقیقاتو غلظت ممکن د 0.05 او 0.5μM ترمنځ وي.
ج.د کينډۍ ضعف: qPCR خورا حساس دی او سپارښتنه کیږي چې کينډۍ کمه کړي.د کنټرول Ct ارزښت د 20 او 35 ترمنځ مناسب دی.
d.د سیسټم چمتو کول: مهرباني وکړئ په الټرا پاک کاري میز کې چمتو کړئ، او پایپټر او د غبرګون ټیوب پرته د نیوکلیز پاتې کیدو څخه؛دا سپارښتنه کیږي چې د فلټر عنصر سره د ټوپک سر وکاروئ.د کراس ککړتیا او ایروسول ککړتیا څخه مخنیوی وکړئ.
2. مطلوب سایکل چلولپروتوکول
| سایکل ګام | تودوخه | وخت | سایکلونه |
| برعکس نقل | 50℃a | 20 دقیقې | 1 |
| ابتدایي-منحل کول | 95℃ | ۵ دقیقې | 1 |
| د پراخیدو غبرګون | 95℃ | ۱۵ ثانیه |
40-45 |
| 60℃ b | 30sec c |
یادونه:
a.ریورس لیږد: تودوخه کولی شي 42 ° C یا 50 ° C غوره کړي.
ب.د امپلیفیکیشن عکس العمل: تودوخه د ډیزاین شوي پریمرونو د Tm ارزښت سره سم تنظیم کیږي.
ج.د فلوروسینس سیګنال استملاک: مهرباني وکړئ د وسیلې لارښود اړتیاو سره سم تجربې پروسیجر تنظیم کړئ.
یادښتونه
مهرباني وکړئ اړین PPE واغوندئ، لکه د لابراتوار کوټ او دستکشې، ترڅو ستاسو روغتیا او خوندیتوب ډاډمن شي.
