یونیورسل SYBR GREEN qPCR پریمکس (نیلي)

د بلی شمیره: HCB5041B

د یونیورسل نیلي qPCR ماسټر مکس (د رنګ پراساس) د 2×ریښتیني وخت کمیتي PCR امپلیفیکیشن لپاره دمخه حل دی چې د لوړ حساسیت او ځانګړتیا لخوا مشخص شوی ، رنګ یې نیلي دی ، او د نمونې اضافه کولو تعقیب اغیزه لري.اصلي برخه Taq DNA پولیمیریز د انټي باډي ګرم پیل کاروي ترڅو د نمونې چمتو کولو پرمهال د پریمر انیل کولو له امله غیر مشخص پراخوالی په مؤثره توګه منع کړي.په ورته وخت کې، فورمول د PCR عکس العمل د لوړولو موثریت ته وده ورکولو لپاره هڅوونکي فکتورونه اضافه کوي او د مختلف GC مینځپانګو (30 ~ 70٪) سره د جینونو پراخیدنه مساوي کوي ، ترڅو کمیتي PCR کولی شي په پراخه کمیت کې ښه خطي اړیکه ترلاسه کړي. سیمهدا محصول ځانګړی ROX غیر فعال حواله رنګ لري، کوم چې د ډیری qPCR وسیلو لپاره د تطبیق وړ دی.دا اړینه نده چې په مختلف وسیلو کې د ROX غلظت تنظیم کړئ.دا یوازې اړینه ده چې پریمر او ټیمپلیټونه اضافه کړئ ترڅو د عکس العمل سیسټم د پراخولو لپاره چمتو کړئ.

اجزا

یونیورسل نیلي qPCR ماسټر مکس

د ذخیره کولو شرایط

محصول د آیس پیکونو سره لیږدول کیږي او د 18 میاشتو لپاره -25℃~-15℃ کې زیرمه کیدی شي.دا اړینه ده چې د عکس العمل سیسټم ذخیره کولو یا چمتو کولو په وخت کې د قوي رڼا وړانګو څخه مخنیوی وشي.

مشخصات

لارښوونې

1. د غبرګون سیسټم

[یادونه]: د کارولو دمخه په ښه ډول سره مخلوط کړئ ترڅو د قوي ټکان څخه د ډیر بلبلونو څخه مخنیوی وشي.

الف) د پریمر غلظت: د پریمر وروستی غلظت 0.2μmol/L دی، او همدارنګه د 0.1 او 1.0μmol/L ترمنځ مناسب کیدی شي.

b) د کينډۍ غلظت: که چيرې کينډۍ د cDNA ذخيره حل نه وي، نو کارول شوي حجم بايد د qPCR عکس العمل د ټول حجم له 1/10 څخه زيات نه وي.

c) د کينډۍ کمول: دا سپارښتنه کیږي چې د cDNA ذخیره محلول 5-10 ځله کم کړئ.د ټیمپلیټ مطلوب مقدار اضافه کول غوره دي کله چې د امپلیفیکیشن لخوا ترلاسه شوي Ct ارزښت 20-30 دورې وي.

d) د عکس العمل سیسټم: دا سپارښتنه کیږي چې د 20μL یا 50μL وکاروئ ترڅو ډاډ ترلاسه شي چې د هدف جین لوړولو اغیزمنتیا او تکرار وړتیا.

e) د سیسټم چمتو کول: مهرباني وکړئ په عالي پاک بینچ کې چمتو کړئ او د نیوکلیز پاتې کیدو پرته لارښوونې او عکس العمل ټیوبونه وکاروئ؛دا سپارښتنه کیږي چې د فلټر کارتوسونو سره لارښوونې وکاروئ.د کراس ککړتیا او ایروسول ککړتیا څخه مخنیوی وکړئ.

2.د غبرګون پروګرام

معیاري پروګرام

چټک پروګرام

[یادونه]: چټک پروګرام د ډیری جینونو لپاره مناسب دی، او معیاري پروګرامونه د انفرادي پیچلي ثانوي جوړښت جینونو لپاره هڅه کیدی شي.

الف) د انیل کولو تودوخې او وخت: مهرباني وکړئ د پریمر او هدف جین اوږدوالي سره سم تنظیم کړئ.

b) د فلوروسینس سیګنال استملاک (★): مهرباني وکړئ د وسیلې کارولو لپاره لارښوونو کې د اړتیاو سره سم تجربې طرزالعمل ترتیب کړئ.

c) د خټکي منحني: د آلې ډیفالټ برنامه په نورمال ډول کارول کیدی شي.

3. د پایلو تحلیل 

د کمیتي تجربو لپاره لږترلږه درې بیولوژیکي نقلونو ته اړتیا وه.د عکس العمل وروسته، د امپلیفیکیشن وکر او د خټکي وکر باید تایید شي.

3.1 امپلیفیکیشن وکر:

معیاري امپلیفیکیشن وکر د S شکل دی.د کمیت تحلیل خورا دقیق دی کله چې د Ct ارزښت د 20 او 30 ترمنځ راټیټ شي. که د Ct ارزښت له 10 څخه کم وي، نو اړینه ده چې سانچه کمه کړئ او بیا ازموینه ترسره کړئ.کله چې د Ct ارزښت د 30-35 ترمنځ وي، نو اړینه ده چې د ټیمپلیټ غلظت یا د عکس العمل سیسټم حجم زیات کړي، ترڅو د امپلیفیکیشن موثریت ته وده ورکړي او د پایلو تحلیل دقت ډاډمن کړي.کله چې د Ct ارزښت له 35 څخه ډیر وي، د ازموینې پایلې نشي کولی په کمیتي ډول د جین بیان تحلیل کړي، مګر د کیفیت تحلیل لپاره کارول کیدی شي.

3.2 د خړوبولو منحل:

د خټکي منحني واحد چوکۍ په ګوته کوي چې د عکس العمل ځانګړتیا ښه ده او کمیتي تحلیل ترسره کیدی شي؛که چیرې د خټکي منحنی دوه یا څو چوکۍ وښيي، کمیتي تحلیل نشي ترسره کیدی.د خټکي وکر دوه ګوني چوټي ښیي، او دا اړینه ده چې قضاوت وشي چې ایا غیر هدف چوکۍ پریمر ډیمر دی یا د DNA اګروز جیل الیکٹروفورسس لخوا غیر مشخص پراخوالی.که دا د پرائمر ډیمر وي، نو سپارښتنه کیږي چې د پریمر غلظت کم کړي یا د لوړ لوړولو موثریت سره پریمر بیا ډیزاین کړي.که دا غیر مشخص پراخوالی وي، مهرباني وکړئ د انیل کولو تودوخه زیاته کړئ، یا پرائمر د ځانګړتیا سره بیا ډیزاین کړئ.

یادښتونه

مهرباني وکړئ اړین PPE واغوندئ، لکه لابراتوار کوټ او دستکشې، ترڅو ستاسو روغتیا او خوندیتوب ډاډمن کړئ!

دا محصول یوازې د څیړنې کارولو لپاره دی!