Proteinase K (Lyophilized پوډر) HC4500A انځور شوی انځور

پروټینز K (لیوفیلیز پوډر)

بلی نمبر: HC4500A

بسته: 100mg/1g/10g/100g/500g

د DNase، RNase، Nickase څخه وړیا

فعالیت: ≥30 U/mg

د شیلف ژوند 3 کاله

د خونې د حرارت درجه کې ترانسپورت

د یوې بستې ظرفیت 30 کیلوګرامه

تفتیش واستوئ

د تولید ځانګړتیاوې

د محصول تفصیل

ډاټا

بلی نمبر: HC4500A

پروټینز K یو مستحکم سیرین پروټیز دی چې د پراخه سبسټریټ ځانګړتیا سره.دا په اصلي حالت کې حتی د صابون په شتون کې ډیری پروټینونه تخریب کوي.د کرسټال او مالیکولر جوړښت مطالعاتو څخه شواهد په ګوته کوي چې انزایم د سبټیلیسین کورنۍ پورې اړه لري چې د فعال سایټ کتلیتیک ټریډ (Asp.₃₉- د هغه₆₉- سر_۲۲۴).د تخریب اصلي ځای د پیپټایډ بانډ دی چې د الفا امینو ګروپونو سره د بند شوي الفا امینو اسیدونو سره د الفاټیک او اروماتیک امینو اسیدونو کاربوکسیل ګروپ سره نږدې دی.دا معمولا د هغې د پراخو لپاره کارول کیږيځانګړتیا

مخکینی: پروټینز K NGS (پاؤډر) HC4507A

بل: 2×PCR سوپر مکس (د رنګ سره) HCR2012A

د ذخیره کولو شرایط

2-8 ℃ لنډ مهاله ذخیره، -25 ~ -15 ℃ اوږدمهاله ذخیره.د وچ پوډر حالت -25~-15℃ د 3 کلونو لپاره اعتبار لري؛د انزایم پوډر باید په مناسب حجم کې منحل شي.

مشخصات

بڼه	له سپین څخه تر سپینه بې مورفوس لیوفیلیز پوډر
فعالیت	≥30 U/mg
DNase	هیڅ ونه موندل شو
RNase	هیڅ ونه موندل شو

ملکیتونه

د EC شمیره	3.4.21.64 (د ټریټراچیم البم څخه بیا ترکیب)
مالیکولر وزن	29 kDa (SDS-PAGE)
isoelectric point	7.81
غوره pH	7.0-12.0 انځور.1
غوره تودوخه	65 ℃ انځور.2
د pH ثبات	pH 4.5-12.5 (25℃، 16h) انځور.3
حرارتي ثبات	لاندې 50℃(pH 8.0, 30min) انځور.4
فعالونکي	SDS، یوریا
مخنیوی کوونکي	ډیسوپروپیل فلوروفاسفیټ؛phenylmethylsulfonyl فلورایډ

غوښتنلیکونه

1. د جینیاتي تشخیص کټ

2. د RNA او DNA استخراج کټونه

3. د نسجونو څخه د غیر پروټین اجزاو استخراج، د پروټین ناپاکۍ تخریب، لکه د DNA واکسین او د هیپرین چمتو کول

4. د کروموزوم DNA چمتو کول د نبض الیکٹروفورسیس په واسطه

5. لویدیځ داغ

6. د ویټرو تشخیص کې انزیماتیک ګلایکوسیلیټ البومین ریجنټونه

وقایې

د کارولو یا وزن کولو پرمهال محافظتي دستکشې او چشمې واغوندئ او د کارولو وروسته ښه هوا وساتئ.دا محصول ممکن د پوټکي الرجیک عکس العمل او د سترګو جدي خارش لامل شي.که تنفس شي، دا کیدای شي د الرجی یا د اسما د نښې نښانې یا ډیسپنیا سبب شي.کیدای شي د تنفسي خارښ لامل شي.

Assay

د واحد تعریف

یو واحد (U) په لاندې شرایطو کې په یوه دقیقه کې د 1 μmol tyrosine تولید لپاره د کیسین هایدرولیس کولو لپاره اړین انزایم مقدار تعریف شوی.

Reagents چمتو کول

Reagent I: 1g د شیدو کیسین د 0.1M سوډیم فاسفیت محلول (pH 8.0) په 50ml کې منحل شوی، د 65-70 ℃ په اوبو کې د 15 دقیقو لپاره مینځل شوی، یخ شوی او منحل شوی، د اوبو په واسطه یخ شوی، د سوډیم هایدروکسایډ لخوا د pH 8.0 حجم سره سمون لري. 100ml.

Reagent II: 0.1M trichloroacetic acid، 0.2M sodium acetate، 0.3M acetic acid.

III Reagent: 0.4M Na₂CO₃حل

IV Reagent: Forint reagent د 5 ځلو لپاره په پاکو اوبو ککړ شوی.

Reagent V: د انزایم کمول: 0.1M سوډیم فاسفیت محلول (pH 8.0).

VI Reagent: tyrosine محلول: 0, 0.005, 0.025, 0.05, 0.075, 0.1, 0.25 umol/ml tyrosine د 0.2M HCL سره منحل.

کړنلاره

1. 0.5ml reagent I مخکې تر 37℃ پورې تودوخه کیږي، 0.5ml د انزایم محلول اضافه کړئ، ښه مخلوط کړئ، او د 10 دقیقو لپاره په 37℃ کې سینګار کړئ.

2. د عکس العمل د مخنیوي لپاره 1 ملی لیتر reagent II اضافه کړئ، ښه مخلوط کړئ او د 30 دقیقو لپاره انکیوبیشن ته دوام ورکړئ.

3. Centrifugate غبرګون محلول.

4. 0.5ml supernatant واخلئ، 2.5ml reagent III، 0.5ml reagent IV اضافه کړئ، ښه مخلوط کړئ او د 30 دقیقو لپاره په 37 ℃ کې سینه کړئ.

5. OD_۶۶۰د OD په توګه ټاکل شوی₁;خالي کنټرول ګروپ: 0.5ml reagent V د OD ټاکلو لپاره د انزایم محلول ځای په ځای کولو لپاره کارول کیږي_۶۶۰د OD په توګه₂, ΔOD=OD₁-OD₂.

6. د L-tyrosine معیاري وکر: 0.5mL مختلف غلظت L tyrosine محلول، 2.5mL reagent III، 0.5mL reagent IV په 5mL سینټرفیوج ټیوب کې، په 37℃ کې د 30mins لپاره انکیوبیټ، د OD لپاره کشف_۶۶۰د L-tyrosine د مختلف غلظت لپاره، بیا معیاري وکر Y=kX+b ترلاسه کړ، چیرته چې Y د L-tyrosine غلظت دی، X OD دی_۶۰۰.

محاسبه

2: د عکس العمل ټول حجم (mL)

0.5: د انزایم محلول حجم (mL)

0.5: د تعامل مایع حجم چې په کروموجنیک تعیین کې کارول کیږي (mL)

10: د عکس العمل وخت (منټ)

Df: ګڼه ګوڼه کمول

Cد انزایم غلظت (mg/mL)

حوالې

1. Wieger U & Hilz H. FEBS Lett.(1972)؛ 23:77.

2. Wieger U & Hilz H. Biochem.بایوفیس.Res.کمیون.(۱۹۷۱)؛۴۴:۵۱۳.

3. هیلز، ایچ.او نوریورو.J. بایوکیم.(1975)؛ 56:103-108.

4. سمبروک جet al. مالیکولر کلونینګ: د لابراتوار لارښود، دویمه نسخه، د سړه پسرلي هاربر لابراتوار پریس، د سړه پسرلي هاربر (1989).

ارقام

اينځر. 1غوره pH

د 100mM بفر حل: pH6.0-8.0، Na-phosphate؛pH8.0-9.0, Tris-HCL;pH9.0-12.5، Glycine-NaOH. انزایم غلظت: 1mg/mL

انځور 2 غوره تودوخه

عکس العمل په 20 mm K-phosphate buffer pH 8.0 کې.د انزایم غلظت: 1mg/mL

انځور 3 pH ثبات

25℃، د 50mM بفر محلول سره 16 h-درملنه: pH 4.5-5.5، Acetate؛pH 6.0-8.0، Na-phosphate؛pH 8.0-9.0، Tris-HCL.pH 9.0-12.5، Glycine-NaOH.د انزایم غلظت: 1mg/mL

شکل 4 حرارتي ثبات

د 50mM Tris-HCL بفر سره 30 دقیقې درملنه، pH 8.0.د انزایم غلظت: 1mg/mL

انځور 5 ذخیره کول ثباتty at 25℃