RT-LAMP رنګمیټریک (لیوفیلیز بال)
دا محصول د عکس العمل بفر، RT-انزایم مکس (Bst DNA پولیمیریز او د تودوخې مقاومت لرونکي ریورس ټرانسکریټس)، لیوفیلیز محافظت کونکي او د کروموجینک رنګ اجزا لري.محصول د لیوفیلیز بال ډول دی ، یوازې د پریمرونو او ټیمپلیټونو سره کارول کیږي.دا کټ د پراخیدنې چټک، روښانه بصری کشف چمتو کوي، کوم چې منفي عکس العمل په سور کې ښودل شوی او مثبت عکس العمل ژیړ ته د بدلون په واسطه ښودل شوی.
اجزا
RT-LAMP د رنګ میټریک ماسټر مکس (لیوفیلیز شوی موتی)
غوښتنلیکونه
د DNA یا RNA isothermal amplification لپاره.
د ذخیره کولو شرایط
په 2 ~ 8 ℃ کې لیږدول شوي او زیرمه شوي.محصول د 12 میاشتو لپاره اعتبار لري.
پروتوکول
1.د ازموینو د شمیر سره سم اړونده شمیره لیوفیلیز شوي موتی پوډر واخلئ.
2.د عکس العمل مخلوط چمتو کړئ
اجزا | حجم |
RT-LAMP د رنګ میټریک ماسټر مکس (لیوفیلیز شوی موتی) | 1 ټوټه (2 مالا) |
10 × پریمر مخلوطa | 5 μL |
کينډۍ DNA/RNA b | 45 μL |
یادونه:
1. 10×پریمر مکس غلظت: 16 μM FIP/BIP، 2 μM F3/B3، 4 μM لوپ F/B؛
2. د نیوکلیک اسید ټیمپلیټونه سپارښتنه کیږي چې د DEPC اوبو په کارولو سره حل شي.
3.د 30-45 دقیقو لپاره په 65 درجې سانتي ګراد کې انکیوب کړئ، کوم چې د رنګ بدلون د غبرګون وخت سره سم په مناسبه توګه غزول کیدی شي.
4.د پټو سترګو له مخې، ژیړ مثبت و او سور منفي و.
یادښتونه
1.د عکس العمل تودوخه د پریمر حالت سره سم د 62 ℃ او 68 ℃ تر مینځ مطلوب کیدی شي.
2.بسته شوي ریجنټونه باید د اوږدې مودې لپاره د هوا سره مخ نشي.
3.د سور او ژېړ رنګ عکس العمل د عکس العمل سیسټم pH بدلون پورې اړه لري، مهرباني وکړئ د Tris nucleic acid ذخیره کولو محلول مه کاروئ، د ddH کارولو سپارښتنه کیږي.2او ذخیره شوي نیوکلیک اسید.
4.تجربه باید په معیاري ډول ترسره شي، په شمول د غبرګون سیسټم چمتو کول، د نمونې درملنه او د نمونې اضافه کول.
5.دا وړاندیز کیږي چې په الټرا کلین میز کې د عکس العمل سیسټم چمتو کړئ او د نورو خونو په فوم هوډ کې ټیمپلیټونه اضافه کړئ ترڅو د غلط څخه مخنیوی وشي.