رنیس اې
Ribonuclease A (RNaseA) یو واحد پولیپټایډ دی چې د 4 ډیسلفایډ بانډونه لري چې مالیکولر وزن یې شاوخوا 13.7 kDa دی.RNase A یو Endoribonuclease دی چې په ځانګړې توګه په C او U پاتې شونو کې واحد-Stranded RNA تخریب کوي.په ځانګړې توګه، کلیویج د فاسفوډیسټر بانډ پیژني چې د نیوکلیوټایډ د 5′-ریبوز لخوا رامینځته شوی او د فاسفیت ګروپ د 3′-ribose په څنګ کې د پیریمیډین نیوکلیوټایډ په برخه کې رامینځته شوی ، نو د 2, 3′-Cyclic corporolyzeding 3. ′نیوکلیوساید فاسفیتونه (د مثال په توګه pG-pG-pC-pA-pG د RNase A لخوا پاک شوی ترڅو pG-pG-pCp او A-PG تولید کړي).RNase A د واحد سټنډ شوي RNA په پاکولو کې خورا فعال دی.وړاندیز شوی کاري غلظت 1-100μG/mL دی، د مختلف غبرګون سیسټمونو سره مطابقت لري.د مالګې ټیټ غلظت (0-100 mM NaCl) د RNA-DNA هایبرډیزیشن لخوا رامینځته شوي د واحد سټنډ شوي RNA ، دوه اړخیز RNA او RNA زنځیرونو پرې کولو لپاره کارول کیدی شي.په هرصورت، د لوړ مالګې غلظت (≥0.3 M) کې، RNase A یوازې په ځانګړې توګه د واحد واحد RNA پاکوي.
RNase A په عام ډول د پلازمیډ DNA یا جینومیک DNA د چمتو کولو پرمهال د RNA لرې کولو لپاره کارول کیږي. که DNase د چمتو کولو پروسې په جریان کې فعال وي یا نه وي په اسانۍ سره عکس العمل اغیزه کولی شي.د اوبو په حمام کې د جوش کولو دودیز میتود د DNase فعالیت غیر فعالولو لپاره کارول کیدی شي.دا محصول DNase او پروټیز نلري، او د کارولو دمخه د تودوخې درملنې ته اړتیا نلري.سربیره پردې ، دا محصول د مالیکول بیولوژی تجربو کې هم کارول کیدی شي لکه د RNase محافظت تحلیل او RNA ترتیب تحلیل.
د ذخیره کولو شرایط
محصول په -25～-15℃ کې زیرمه کیدی شي، د 2 کلونو لپاره اعتبار لري.
لارښوونې
دا د RNase A ذخیره کولو حل چمتو کولو لپاره یو له عام میتودونو څخه دی.دا هم کولای شي له خوا چمتو شينور میتودونه په لابراتوار کې د دودیزو میتودونو سره سم یا د حوالې ادبیات (لکهپه مستقیم ډول په 10 mM Tris-HCl، pH 7.5 یا Tris-NaCl محلول کې حل کیږي)
1. د RNase A ذخیره کولو محلول 10 mg/mL چمتو کولو لپاره 10 mM سوډیم اسټیټ (pH 5.2) وکاروئ
2. د 15 دقیقو لپاره په 100 ℃ کې تودوخه
3. د خونې د حرارت درجه یخ کړئ، د 1 M Tris-HCl (pH 7.4) 1/10 حجم اضافه کړئ، pH یې 7.4 ته تنظیم کړئ (د دې لپارهد مثال په توګه، 500 ml 10g/ml RNase ذخیره کولو محلول 1M Tris-HCL، PH7.4 اضافه کړئ)
4. د منجمد ذخیرې لپاره په -20 ℃ کې فرعي بسته شوي، کوم چې تر 2 کلونو پورې مستحکم کیدی شي.
[یادونه]: کله چې د غیر جانبدار شرایطو لاندې د RNaseA محلول جوش کول، د RNase باران به رامینځته شي؛دا په ټیټ pH کې جوش کړئ، او که چیرې باران شتون ولري، دا لیدل کیدی شي، چې کیدای شي د پروټین ناپاکۍ شتون له امله وي.که چیرې د جوش کولو وروسته سلاد وموندل شي، نجاست د لوړ سرعت سینټرفیوګیشن (13000rpm) په واسطه لرې کیدی شي، او بیا د یخولو ذخیره کولو لپاره فرعي بسته بندي کیږي.
د محصول معلومات
| مترادف | ریبونیوکلیز I؛د پانکریټیک ریبونیوکلیز؛ریبونیوکلیز 3'-pyrimidnooligonucleotidohydrolase;Rnase A;Endoribonulcease I |
| CAS شمیره | 9001-99-4 |
| بڼه | سپین لیوفیلیز پوډر |
| مالیکولر وزن | ~ 13.7kDa (د امینو اسید ترتیب) |
| د پی ایچ ارزښت | 7.6 (د فعالیت حد 6-10) |
| مناسب حرارت | 60℃ (د فعالیت حد 15-70℃) |
| د فعالولو اجنټ | Na2+.ک+ |
| مخنیوی کوونکی | د Rnase مخنیوی کونکی |
| د غیر فعالولو طریقه | د تودوخې په واسطه غیر فعال نشي، سپارښتنه کیږي چې د سنټرفیوج کالم وکاروئ |
| اصل | غوښه |
| محلولیت | په اوبو کې محلول (10mg/ml) |
| په وچه کې تاوان | ≤5.0% |
| د انزایم فعالیت | ≥60 Kunitz واحدونه/mg |
| isoelectric point | 9.6 |
یادښتونه
ستاسو د خوندیتوب او روغتیا لپاره، مهرباني وکړئ د عملیاتو لپاره د لابراتوار کوټونه او د ضایع کیدو وړ دستکشې واغوندئ.
