رنیس اې
Ribonuclease A(RNaseA) یو واحد پولی پیپټایډ دی چې د 4 ډیسلفایډ بانډونه لري چې مالیکولر وزن یې شاوخوا 13.7 kDa دی.RNase Ais یو Endoribonuclease دی چې په ځانګړې توګه په C او U پاتې شونو کې د واحد واحد RNA تخریب کوي.په ځانګړې توګه، کلیویج د فاسفوډیسټر بانډ پیژني چې د نیوکلیوټایډ د 5'-ریبوز لخوا رامینځته شوی او د فاسفیت ګروپ د 3'-ribose په شاوخوا کې د پیریمیډین نیوکلیوټایډ په برخه کې رامینځته شوی ، نو د 2,3'-Cyclic فاسفیتونه د هایدرولیز کولو سره 3'-Ribose دي. نیوکلیوسایډ فاسفیتونه (د مثال په توګه pG-pG-pC-pA-pG د RNase A لخوا پاک شوی ترڅو pG-pG-pCp او A-PG تولید کړي).RNase A د واحد سټنډ شوي RNA په پاکولو کې خورا فعال دی.وړاندیز شوی کاري غلظت 1- 100 μG/mL دی، د مختلف غبرګون سیسټمونو سره مطابقت لري.د مالګې ټیټ غلظت (0-100 mM NaCl) د RNA-DNA هایبرډیزیشن لخوا رامینځته شوي د واحد سټنډ شوي RNA ، دوه اړخیز RNA او RNA زنځیرونو پرې کولو لپاره کارول کیدی شي.
په هرصورت، د لوړ مالګې غلظت (≥0.3 M) کې، RNase A یوازې په ځانګړې توګه د واحد واحد RNA پاکوي.
RNase A په عام ډول د پلازمیډ DNA یا جینومیک DNA چمتو کولو پرمهال د RNA لرې کولو لپاره کارول کیږي.ایا DNase د چمتو کولو پروسې په جریان کې فعال وي یا نه کولی شي په اسانۍ سره عکس العمل اغیزه وکړي.د اوبو په حمام کې د جوش کولو دودیز میتود د DNase فعالیت غیر فعالولو لپاره کارول کیدی شي.دا محصول DNase او پروټیز نلري، او د کارولو دمخه د تودوخې درملنې ته اړتیا نلري.سربیره پردې ، دا محصول د مالیکول بیولوژي تجربو کې هم کارول کیدی شي لکه د RNase محافظت تحلیل او RNA ترتیب تحلیل.
د ذخیره کولو شرایط
محصول باید د 2 کلونو لپاره په -25 ℃ ~ - 15 ℃ کې زیرمه شي.
مشخصات
| بڼه | پوډر |
| مقدار | 100mg / 1g |
| د محصول ډول | RNase A |
لارښوونې
دا د RNase A ذخیره کولو حل چمتو کولو لپاره یو له عام میتودونو څخه دی.دا هم چمتو کیدی شيد نورو میتودونو په واسطه په لابراتوار کې د دودیزو میتودونو مطابق یا د حوالې ادب (لکهپه مستقیم ډول په 10 mM Tris-HCl، pH 7.5 یا Tris-NaCl محلول کې حل کیږي)
1. د RNase A ذخیره کولو محلول 10 mg/mL چمتو کولو لپاره 10 mM سوډیم اسټیټ (pH 5.2) وکاروئ.
2. د 15 دقیقو لپاره په 100 ℃ کې تودوخه.
3. د خونې د حرارت درجه یخ کړئ، د 1 M Tris-HCl (pH 7.4) 1/10 حجم اضافه کړئ، pH یې 7.4 ته تنظیم کړئ (د دې لپارهد مثال په توګه، 500 mL 10 mg/mL RNase ذخیره کولو محلول 1 M Tris-HCl، pH7.4 اضافه کړئ.
4. د منجمد ذخیرې لپاره په -20 ℃ کې فرعي بسته شوي، کوم چې تر 2 کلونو پورې مستحکم کیدی شي.
[یادونه]:
کله چې د غیر جانبدار شرایطو لاندې د RNaseA محلول جوش کول، د RNase باران به رامینځته شي.دا په ټیټ pH کې جوش کړئ، او که چیرې باران شتون ولري، دا لیدل کیدی شي، چې کیدای شي د پروټین ناپاکۍ شتون له امله وي.که چیری د جوش کولو وروسته پړسوب وموندل شي، ناپاکتیا د لوړ سرعت سینټرفیوګریشن (13000rpm) په واسطه لیرې کیدی شي، او بیا د یخولو ذخیره کولو لپاره فرعي بسته بندي کیږي.
یادښتونه
مهرباني وکړئ اړین PPE واغوندئ، لکه لابراتوار کوټ او دستکشې، ترڅو ستاسو روغتیا او خوندیتوب ډاډمن کړي.
