د ویروس DNA/RNA استخراج کټ
دا کټ د نمونو څخه د لوړ پاکوالي ویروس DNA/RNA د ګړندي استخراج لپاره مناسب دی لکه nasopharyngeal swabs، محیطي سویبونه، د حجرو کلتور سپرناټینټ، او د نسج هوموجنیټ سپرناټینټ.دا کټ د سیلیکا جھلی پاکولو ټیکنالوژۍ پراساس دی چې د لوړ کیفیت ویروس DNA/RNA استخراج لپاره د فینول/کلوروفارم عضوي محلولونو یا د وخت مصرف الکول باران کارولو اړتیا له مینځه وړي.ترلاسه شوي نیوکلیک اسیدونه د ناپاکۍ څخه پاک دي او د لاندې جریان تجربو کې د کارولو لپاره چمتو دي لکه ریورس ټرانسکرپشن، PCR، RT-PCR، ریښتیني وخت PCR، د راتلونکي نسل ترتیب (NGS)، او شمالي بلاټ.
د ذخیره کولو شرایط
په 15 ~ 25 ℃ کې ذخیره کړئ، او د خونې په حرارت درجه کې لیږدول
اجزا
| اجزا | 100RXNS |
| بفر VL | 50 ملی لیتر |
| بفر RW | 120 ملی لیتر |
| RNase وړیا ddH2 O | 6 ملی لیتر |
| فاسټ پیور RNA کالمونه | 100 |
| د راټولولو ټیوبونه (2ml) | 100 |
| د RNase وړیا راټولولو ټیوبونه (1.5ml) | 100 |
بفر VL:د لیسز او پابندۍ لپاره چاپیریال چمتو کړئ.
بفر RW:پاتې پروټینونه او نور ناپاکۍ لرې کړئ.
له RNase څخه پاک ddH2O:په سپن کالم کې د غشا څخه د DNA/RNA Elute.
د فاسټ پیور RNA کالمونه:په ځانګړې توګه DNA/RNA جذبوي.
د راټولولو ټیوب 2 ملی لیتر:فلټر راټول کړئ.
د RNase وړیا راټولولو ټیوب 1.5 ملی لیتر:DNA/RNA راټول کړئ.
غوښتنلیکونه
Nasopharyngeal swabs، محیطي سویبونه، د حجرو کلتور سپرناټینټ، او د نسج هوموجنیټ سپرناټینټ.
پخپله چمتو شوی میټرials
د RNase څخه پاک پایپټ لارښوونې، 1.5 ملی لیتر RNase وړیا سینټرفیوج ټیوبونه، سینټرفیوج، ورټیکس مکسر، او پایپټ.
د تجربې بهیر
د بایو خوندیتوب کابینې کې لاندې ټول مرحلې ترسره کړئ.
1. 200 μl نمونه د RNase څخه پاک سنټرفیوج ټیوب ته اضافه کړئ (د ناکافي نمونې په صورت کې د PBS یا 0.9٪ NaCl سره جوړ کړئ) ، 500 μl بفر VL اضافه کړئ ، د 15 – 30 ثانیو لپاره د وورتیکس کولو سره ښه مخلوط کړئ ، او سینټرفیوج په لنډه توګه د ټیوب په ښکته کې مخلوط راټول کړئ.
2. FastPure RNA کالمونه په یوه ټولګه ټیوب کې 2 ملی لیتره ځای په ځای کړئ.مخلوط د 1 مرحلې څخه د فاسټ پیور RNA کالمونو ته انتقال کړئ، د 1 دقیقې لپاره په 12,000 rpm (13,400 × g) کې سینټرفیوژ کړئ، او فلټریټ پریږدئ.
3. په FastPure RNA کالمونو کې 600 μl بفر RW اضافه کړئ، په 12,000 rpm (13,400 × g) کې د 30 ثانیو لپاره سینټرفیوج کړئ، او فلټریټ یې رد کړئ.
4. دریم ګام بیا تکرار کړئ.
5. خالي کالم په 12,000 rpm (13,400 × g) کې د 2 دقیقو لپاره سینټرفیوج کړئ.
6. د FastPure RNA کالمونه په دقت سره په نوي RNase-free کلیکشن ټیوب 1.5 ml (کټ کې چمتو شوي) ته انتقال کړئ، او 30-50 μl RNase-free ddH2O د غشا مرکز ته پرته له دې چې کالم ته لمس کړئ.اجازه راکړئ چې د 1 دقیقې لپاره د خونې په تودوخې کې ودریږئ او د 12,000 rpm (13,400 × g) کې د 1 دقیقو لپاره سینټرفیوج کړئ.
7. د فاسټ پیور RNA کالمونه پریږدئ.DNA/RNA په مستقیم ډول د راتلونکو ازموینو لپاره کارول کیدی شي، یا د لنډې مودې لپاره -30 ~ -15 ° C یا د اوږدې مودې لپاره -85 ~ -65 ° C کې زیرمه کیدی شي.
یادښتونه
یوازې د څیړنې لپاره کارول کیږي.د تشخیص پروسیجرونو کې د کارولو لپاره نه.
1. نمونې مخکې له مخکې د خونې د حرارت درجه سره انډول کړئ.
2. ویروسونه ډیر ساري دي.مهرباني وکړئ ډاډ ترلاسه کړئ چې د تجربې دمخه ټول اړین خوندیتوب احتیاطي تدابیر نیول شوي.
3. د نمونې د تکرار او یخولو څخه ډډه وکړئ، ځکه چې دا کیدای شي د ایستل شوي ویروس DNA/RNA د تخریب یا کمیدو لامل شي.
4. پخپله چمتو شوي تجهیزات کې د RNase څخه پاک پایپټ لارښوونې، د 1.5 ملی لیتر RNase څخه پاک سنټرفیوج ټیوبونه، سینټرفیوج، ورټیکس مکسر، او پایپ شامل دي.
5. کله چې کټ وکاروئ، د لابراتوار کوټ، د ډیسپوز وړ لیټیکس دستکشې، او د ضایع کیدو وړ ماسک واغوندئ او د RNase د ککړتیا خطر کمولو لپاره د RNase څخه پاک مصرفي توکي وکاروئ.
6. ټول مرحلې د خونې د حرارت درجه ترسره کړئ پرته لدې چې مشخص شوي وي.
میکانیزم او کاري جریان
