DNase I (Rnase Free) (2u/ul)
بلی نمبر: HC4007B
DNase I یو Endonuclease دی چې کولی شي واحد یا دوه اړخیزه DNA هضم کړي.دا کولی شي د فاسفوډیسټر بانډونه هایدرولیس کړي ترڅو مونو او اولیګوډوکسینیوکلیوټایډونه تولید کړي چې د 5'-فاسفیټ ګروپ او 3'-OH ګروپ لري.د DNase I غوره کاري pH حد 7-8 دی.د DNase I فعالیت په Ca پورې اړه لري2+او د divalent فلزي آیونونو لکه CO لخوا فعال کیدی شي2, Mn2+, Zn2+, etc. د Mg په شتون کې2+, DNase زه کولی شم په تصادفي ډول د دوه اړخیزه DNA هر سایټ پاک کړم؛پداسې حال کې چې د Mn په شتون کې2+, DNase I کولی شي په ورته ځای کې DNA دوه اړخیزه ټوټه ټوټه کړي، د 1-2 نیوکلیوټایډونو د خپریدو سره خړوب شوي پایونه یا چپکونکي پایونه جوړوي.دا د مختلفو RNA نمونو پروسس لپاره کارول کیدی شي.
اجزا
نوم | 1KU | 5KU |
Recombinant DNaseI (RNase-free) | 500 μL | 5 × 500 μL |
DNase I عکس العمل بفر (10×) | 1 ملی لیتر | 5 × 1mL |
د ذخیره کولو شرایط
دا محصول باید د 2 کلونو لپاره -25~-15℃ کې زیرمه شي.مهرباني وکړئ د بار بار کنګل کولو څخه ډډه وکړئ.
لارښوونې
یوازې د حوالې لپاره د RNA نمونو څخه د DNA لرې کولو لپاره پلي شوی.
1. مهرباني وکړئ د لاندې عکس العمل سیسټم چمتو کولو لپاره د RNase څخه پاک سینټرفیوج ټیوبونه او پایپټ لارښوونې وکاروئ:
اجزا | حجم (μL) |
DNase I عکس العمل بفر (10×) | 1 |
Recombinant DNasel (RNase-free) | 1 |
RNA | X |
د RNase څخه پاک ddH2O | تر 10 پورې |
2. د عکس العمل شرایط په لاندې ډول دي: 37℃، د 15-30 دقیقو وروسته، د 2.5 mM EDTA محلول وروستی غلظت اضافه کړئ او ښه مخلوط کړئ، بیا د 10 دقیقو لپاره 65℃.پروسس شوی ټیمپلیټ د RT-PCR یا RT-qPCR تجربو او نورو لپاره کارول کیدی شي.
یادښتونه
1. DNase l د فزیکي تخریب سره حساس دی؛کله چې مخلوط شي، په نرمۍ سره د ټیسټ ټیوب بیرته راوباسئ اوښه وخورئ، په زور سره مه وهئ.
2. انزایم باید د یخ په بکس یا د یخ حمام کې زیرمه شي کله چې کارول کیږي، او د کارولو وروسته سمدستي باید په -20 ℃ کې زیرمه شي.
3. دا محصول یوازې د څیړنې کارولو لپاره دی.
4. مهرباني وکړئ د خپل خوندیتوب لپاره د لابراتوار کوټونو او د مصرف وړ دستکشو سره کار وکړئ.