یو ګام RT-qPCR SYBR شنه پریمکس
بلی نمبر: HCB5140A
یو ګام RT-qPCR Syber Green Premix د SYBR ګرین I رنګ پر بنسټ د فلوروسینس اندازه کولو لپاره دی.د جین ځانګړي پرائمرونو په کارولو سره ، د بیرته راګرځیدو لیږد او qPCR عکس العملونه په یو ټیوب کې بشپړ شوي ، د بار بار کیپ خلاصولو او پایپ کولو عملیاتو اړتیا له مینځه وړي ، د ارزونې موثریت خورا ښه کوي او د ککړتیا خطر کموي.د RNA نمونو لپاره، کټ د اغیزمن cDNA ترکیب لپاره د تودوخې مقاومت لرونکي ریورس ټرانسکریپټیس او د کمیتي لوړولو لپاره د هاټ سټارټ ټیک DNA پولیمریز کاروي.د مطلوب بفر سیسټم لاندې، د کټ حساسیت د لوړ څرګند شوي هدفونو لپاره د 0.1 pg په اندازه او د اعتدال څرګند شوي اهدافو لپاره تر 1 pg پورې لوړ کیدی شي.کټ د DNA نمونو پراخولو او مقدار کولو لپاره مناسب دی.دا د مختلفو نباتاتو او حیواناتو نمونو، حجرو او مایکروجنیزمونو څخه د نیوکلیک اسیدونو حساس کشف او اندازه کولو توان ورکوي.
اجزا
No | نوم | حجم | حجم |
1 | پرمختللی بفر | 250 μL | 2×1.25 ملی لیتر |
2 | پرمختللي انزایم مخلوط | 20 μL | 200 μL |
3 | RNase Free H2O | 250 μL | 2×1.25 ملی لیتر |
د ذخیره کولو شرایط
دا محصول باید د 1 کال لپاره د رڼا څخه لیرې په -25~-15℃ کې زیرمه شي.
لارښوونې
1. د غبرګون سیسټم ترتیبd
اجزا | حجم (μL) | حجم (μL) | وروستی تمرکز |
پرمختللی بفر | 12.5 | 25 | ۱× |
پرمختللي انزایم مخلوط | 1 | 2 | - |
فارورډ پریمر (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
ریورس پریمر (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
RNA ټیمپلیټb | X | X | - |
RNase Free H2اوc | تر 25 پورې | تر 50 پورې | - |
یادونه:
1) یو.ټد هغه وروستی پریمر غلظت 0.2 μmol/L و، کوم چې د 0.1 او 1μmol/L ترمنځ هم مناسب کیدی شي.
2) ب.ریجنټ خورا حساس دی، د ټول RNA سره د 1pg-1μg په حد کې، او د انسان نمونو ازموینې د 1 pg-100 ng غوره انپټ ښودلی، چې د 15-30 په حد کې د Ct ټولیز ارزښت کنټرولوي.
3) ج.دا سپارښتنه کیږي چې 20μL یا 50μL وکاروئ ترڅو د هدف جین لوړولو اعتبار او بیا تولید یقیني شي.
4) د.مهرباني وکړئ په الټرا کلین بنچ کې چمتو کړئ او د نیوکلیز پاتې شونو څخه پاک لارښوونو او عکس العمل ټیوبونو څخه کار واخلئ؛د فلټر کارتوسونو سره لارښوونې وړاندیز کیږي.د کراس ککړتیا او ایروسول ککړتیا څخه مخنیوی وکړئ.
2.د غبرګون پروګرام
د سایکل ګام | تودوخه | وخت | سایکلونه |
برعکس نقل | 50℃a | ۶ دقیقې | 1 |
ابتدايي تخریب | 95℃ | ۵ دقیقې | 1 |
د پراخیدو غبرګون | 95℃ | 15 ثانیې | 40 |
60℃b | 30 ثانیې | ||
د خټکي منحني مرحله | د وسیلې ډیفالټ | 1 |
یادونه:
1) یو.د ریورس ټرانسکرپشن تودوخه د تجربې اړتیاو سره سم د 50-55 ° C ترمینځ غوره کیدی شي.د DNA نمونو لپاره، د بیرته راګرځیدونکي لیږد پروسه پریښودل کیدی شي.
2) ب.په ځانګړو قضیو کې د انیل کولو / توسیع تودوخې د پریمر Tm ارزښت سره سم تنظیم کیدی شي ، 60 ° C توصیه کیږي.
یادښتونه
1. دا محصول یوازې د څیړنې کارولو لپاره دی.
2. مهرباني وکړئ د خپل خوندیتوب لپاره د لابراتوار کوټونو او د مصرف وړ دستکشو سره کار وکړئ.