یو ګام ګړندی RT-qPCR Probe Premix-UNG
د بلی شمیره: HCR5143A
یو ګام RT-qPCR تحقیقات کټ (د چټک لپاره) د تحقیقاتو پر بنسټ د RT-qPCR چټک کشف کټ دی چې د واحد پلیکس یا ملټي پلیکس کمیتي PCR لپاره مناسب دی چې RNA د ټیمپلیټ په توګه کاروي (لکه RNA ویروس).دا محصول د انټي باډي تعدیل شوي Taq DNA پولیمیریز نوی نسل او یو ګام وقف شوی ریورس ټرانسکریپټیس کاروي ، د ګړندي امپلیفیکیشن لپاره مطلوب بفر سره ، کوم چې د ګړندي امپلیفیکیشن سرعت ، د لوړ لوړولو موثریت او ځانګړتیا لري.دا په لنډ وخت کې د ټیټ او لوړ غلظت نمونو دواړه واحد-پلیکس او ملټي پلیکس کې متوازن امپلیفیکیشن ملاتړ کوي.
اجزا
1. 5×RT-qPCR بفر (U+)
2. د انزایم مخلوط (U+)
یادونه:
a.5×RT-qPCR بفر (U+) کې dNTP او Mg شامل دي2+;
ب.د انزایم مکس (U+) کې ریورس ټرانسکریټیس، د هاټ سټارټ ټیک DNA پولیمریز، RNase مخنیوی او UDG شامل دي؛
ج.د RNase وړیا لارښوونې، EP ټیوبونه، او داسې نور وکاروئ.
د کارولو دمخه، د 5×RT-qPCR بفر (U+) په بشپړه توګه سره مخلوط کړئ.که چیرې د تودوخې وروسته باران شتون ولري، د بفر د خونې تودوخې ته د بیرته راستنیدو انتظار وکړئ، مخلوط او منحل کړئ، او بیا یې په نورمال ډول وکاروئ.
د ذخیره کولو شرایط
محصول د وچ یخ سره لیږدول کیږي او د 1 کال لپاره -25~-15℃ کې زیرمه کیدی شي.
لارښوونې
1. غبرګون سیسټم
| اجزا | حجم (20 μL غبرګون) |
| 2 ×RT-qPCR بفر | 4μL |
| د انزایم مخلوط (U+) | 0.8μL |
| پریمر فارورډ | 0.1~ 1.0μM |
| پریمر ریورس | 0.1~ 1.0μM |
| د تقمان تحقیقات | 0.05~0.25μM |
| کينډۍ | X μL |
| RNase وړیا اوبه | تر 25μL پورې |
یادونه: د عکس العمل حجم 10-50μL دی.
2. د سایکل چلولو پروتوکول (Sتندر)
| سایکل ګام | تودوخه | وخت | سایکلونه |
| برعکس نقل | 55 ℃ | 10 دقیقې | 1 |
| ابتدايي تخریب | 95 ℃ | 30 ثانیې | 1 |
| له منځه وړل | 95 ℃ | 10 ثانیې | 45 |
| اینیلینګ/توسیع | 60 ℃ | 30 ثانیې |
| د سایکل چلولو پروتوکول (چټک) سایکل ګام |
تودوخه |
وخت |
سایکلونه |
| برعکس نقل | 55 ℃ | 5 دقیقې | 1 |
| ابتدايي تخریب | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| له منځه وړل | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| اینیلینګ/توسیع | 60 ℃ | 10 s |
یادونه:
a.د ریورس ټرانسکرپشن تودوخه د 50 ℃ څخه تر 60 ℃ پورې ده، د تودوخې زیاتوالی د پیچلو جوړښتونو او د لوړ CG منځپانګې ټیمپلیټونو پراخولو کې مرسته کوي؛
ب.د انیل کولو مطلوب تودوخه باید د پریمر د Tm ارزښت پراساس تنظیم شي، او د ریښتیني وخت PCR وسیلې پراساس د فلوروسینس سیګنال راټولولو لپاره ترټولو لنډ وخت وټاکئ.
یادښتونه
مهرباني وکړئ اړین PPE واغوندئ، لکه لابراتوار کوټ او دستکشې، ستاسو روغتیا او خوندیتوب ډاډمن کړئ!
