د Rnase مخنیوی کونکی (د ګلیسرول څخه پاک)
Murine RNase inhibitor یو recombinant murine RNase inhibitor دی چې څرګند شوی او د E.coli څخه پاک شوی.دا د RNase A، B یا C سره په 1: 1 تناسب کې د غیر covalent bonding له لارې تړل کیږي، په دې توګه د دریو انزایمونو فعالیت منع کوي او RNA د تخریب څخه ساتي.په هرصورت، دا د Aspergillus څخه د RNase 1، RNase T1، S1 Nuclease، RNase H یا RNase په وړاندې اغیزمن ندي.د مورین RNase مخنیوی د RT-PCR، RT-qPCR او IVT mRNA لخوا ازمول شوی و، او د بیالبیلو سوداګریزو ریورس ټرانسکریپټیسس، DNA پولیمیریز او RNA پولیمیریز سره مطابقت درلود.
د انساني RNase مخنیوی کونکو په پرتله، د مورین RNase مخنیوی کونکي دوه سیستینونه نلري چې د اکسیډریشن سره خورا حساس دي چې د مخنیوی کونکي غیر فعال کیدو لامل کیږي.دا د DTT په ټیټ غلظت (له 1 mM څخه کم) کې باثباته کوي.دا ځانګړتیا دا د عکس العملونو لپاره د کارولو لپاره مناسبه کوي چیرې چې د DTT لوړ غلظت د عکس العمل لپاره منفي وي (د بیلګې په توګه د ریښتیني وخت RT-PCR).
Aغوښتنلیک
دا محصول په پراخه کچه په هره تجربه کې کارول کیدی شي چیرې چې د RNase مداخله ممکنه وي ترڅو د RNA تخریب مخه ونیسي، لکه:
1. د لومړي پوړ cDNA ترکیب، RT-PCR، RT-qPCR، او داسې نور؛
2. د ان ویټرو لیږد/ژباړې (د بیلګې په توګه په ویټرو کې د ویروس نقل) کې د RNA له تخریب څخه ساتنه وکړئ؛
3. د RNA د جلا کولو او پاکولو په وخت کې د RNase فعالیت مخنیوی.
د ذخیره کولو شرایط
په -25～-15℃ کې ذخیره کول؛
د کنګل کولو دوره ≤ 5 ځله؛
د 1 کلونو لپاره اعتبار لري.
د واحد تعریف
یو واحد د RNase Inhibitor مقدار په توګه تعریف شوی چې د RNase A د 5 ng فعالیت 50٪ منع کولو لپاره اړین دی.
مالیکولر وزن
RNase Inhibitor (Glycerol-free) د 50 kDa پروټین دی.
د کیفیت کنټرول
Exonuclease فعالیت:
د 1 μg λ-Hind III هضم DNA سره د 16 ساعتونو لپاره د 37 درجې سانتي ګراد سره د 40 U انزایم انکیوبیشن په پایله کې د DNA هیڅ ډول تخریب ندی رامینځته شوی لکه څنګه چې د جیل الیکٹروفورسیس لخوا ټاکل کیږي.
د Endonuclease فعالیت:
د 16 ساعتونو لپاره د 1 μg λ DNA سره 40 U انزایم په 37 ° C تودوخه کې د DNA د کشف وړ تخریب لامل نه شو لکه څنګه چې د جیل الیکٹروفورسیس لخوا ټاکل کیږي.
نیکینګ فعالیت:
د 16 ساعتونو لپاره د 1 μg pBR322 سره د 40 U انزایم په 37 ℃ کې د انزایمونو مینځلو په پایله کې د DNA هیڅ ډول تخریب ندی رامینځته شوی لکه څنګه چې د جیل الیکٹروفورسیس لخوا ټاکل کیږي.
RNase فعالیت:
د 1.6 μg MS2 RNA سره د 40 U انزایمونو انکیوبیشن د 4 ساعتونو لپاره په 37 ℃ کې د RNA د کشف وړ تخریب لامل نه شو لکه څنګه چې د جیل الیکٹروفورسیس لخوا ټاکل کیږي.
E.کولی DNA:
40 U انزایم د TaqMan qPCR لخوا کشف شوی.د E.coli DNA ≤ 0. 1pg/40U دی.
Nاوټs
1. د انزایمونو د غیر فعالیدو د مخنیوي لپاره په زور سره مه وخورئ.
2.RNase مخنیوی کونکی د 25℃ څخه تر 55℃ پورې د تودوخې په درجه کې فعال دی او په ≥65℃ کې غیر فعال کیږي.
3. د RNase H، RNase 1، او RNase T1 فعالیت نه منع کیږي.
4. د RNase د فعالیت د مخنیوي لپاره د pH سلسله پراخه ده (په pH 5-9 کې فعاله)، په pH 7-8 کې اعظمي فعالیت څرګندوي.
