2×HiF Taq پلس ماسټر مکس
د بلی شمیره: HCR2014B
د HIF ټیک پلس ماسټر مکس (د رنګ سره) د کارولو لپاره چمتو 2×پریمکس محلول دی چې پلس HIF DNA پولیمیریز، dNTPs، او مطلوب بفر لري.د خونې په حرارت کې دوه مونوکلونل انټي باډي چې د پولیمیریز فعالیت منع کوي او د 3′→5′exonuclease فعالیت په ماسټر مکس کې د اسانه او خورا ځانګړي هاټ سټارټ PCR لپاره اضافه کیږي.د توسعې فکتور په ماسټر مکس کې اضافه کیږي ترڅو انزایم ته د اوږدې ټوټې پراخولو ظرفیت ورکړي، د امپلیفیکیشن اوږدوالی تر 13 kb پورې وي، انزایم د 5′→ 3′ DNA پولیمریز فعالیت او 3′→ 5′ لري. د exonuclease فعالیت، د دې وفاداري د Taq DNA پولیمیریز په پرتله 83 ځله دی، کوم چې د عادي DNA پولیمیریز په پرتله 9 ځله دی.دا د پیچلي ټیمپلیټونو د لوړولو لپاره مناسب دی ، د امپلیفیکیشن محصول یو روښانه پای دی.
2×HIF ټیک پلس ماسټر مکس (د رنګ سره) د ګړندي او اسانه ، لوړ حساسیت ، قوي ځانګړتیا ، ښه ثبات او داسې نورو ګټې لري ، د عکس العمل سیسټم یوازې پریمر او ټیمپلیټونو اضافه کولو ته اړتیا لري ، او د دوه لخوا پراخه کیدی شي. د ګام پروتوکول، د تجربوي ګامونو ساده کول او د وخت خوندي کول.دا محصول د الیکٹروفورسیس شاخص رنګونه لري، او د PCR محصولات مستقیم د الیکٹروفورسس لپاره کارول کیدی شي.سربیره پردې ، محصول یو ځانګړی محافظتي اجنټ هم لري ، ترڅو ماسټر مکس د بار بار کنګل کیدو وروسته مستحکم فعالیت وساتي.
د ذخیره کولو شرایط
محصولات باید د 1 کال لپاره -25~-15℃ کې زیرمه شي.
مشخصات
د محصول مشخصات | ماسټر مخلوط |
تمرکز | 2× |
ګرم پیل | جوړ شوی ګرم پیل |
اوورنګ | بلنټ |
د عکس العمل سرعت | چټک |
اندازه (وروستی محصول) | تر 13kb پورې |
د ترانسپورت شرایط | وچه یخ |
د محصول ډول | د لوړ وفاداري PCR پریمکسونه |
لارښوونې
1.د PCR عکس العمل سیسټم
اجزا | حجم (μL) |
د DNA کينډۍ | مناسب |
فارورډ پریمر (10 μmol/L) | 2.5 |
ریورس پریمر (10 μmol/L) | 2.5 |
2×HIF تاق پلس ماسټر مکس | 25 |
ddH2O | تر 50 پورې |
2.د مختلف ټیمپلیټونو کارول وړاندیز شوي
د کينډۍ ډول | ټوټې له 1kb څخه تر 10 kb پورې پراخه کړئ |
جینومیک DNA | 50ng-200 ng |
پلازمیډ یا ویروس DNA | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 μL (د وروستي PCR عکس العمل حجم له 10٪ څخه ډیر مه کوئ) |
3.د پراخولو پروتوکول
1) دوه مرحلې پروتوکول (پیچلتیا نمونه)
د سایکل ګام | تودوخه | وخت | سایکلونه |
ابتدايي تخریب | 98℃ | 3 دقیقې | 1 |
له منځه وړل | 98℃ | 10sec | 30-35 |
تمدید | 68℃ | 30 ثانیې/کیلوبایټ | |
وروستی تمدید | 72℃ | 5 دقیقې | 1 |
2) درې مرحلې پروتوکول (منظم پروتوکول)
د سایکل ګام | تودوخه | وخت | سایکلونه |
ابتدايي تخریب | 98℃ | 3 دقیقې | 1 |
له منځه وړل | 98℃ | 10sec | 30-35 |
annealing | 60℃ | 20 ثانیې | |
تمدید | 72℃ | 30 ثانیې/کیلوبایټ | |
وروستی تمدید | 72℃ | 5 دقیقې | 1 |
3) د انیل کولو ګریډینټ پروتوکول (پیچلتیا ټیمپلیټ)
د سایکل ګام | دحرارت درجه | وخت | سایکلونه |
ابتدايي تخریب | 98℃ | 3 دقیقې | 1 |
له منځه وړل | 98℃ | 10 ثانیې | ۱۵(په هر دور کې 1℃ کمښت) |
تدریجي annealing | 70-55℃ | 20 ثانیې | |
تمدید | 72℃ | 30 ثانیې/کیلوبایټ | |
له منځه وړل | 98℃ | 10 ثانیې |
20 |
annealing | 55℃ | 20 ثانیې | |
تمدید | 72℃ | 30 ثانیې/کیلوبایټ | |
وروستی تمدید | 72℃ | 5 دقیقې | 1 |
د مختلف امپلیفیکیشن پروتوکول لاندې ځانګړتیاوې
پروتوکوl | دوه ګامه | درې ګامه | تدریجي annealing |
سپیک. | چټک | منځنی | ورو |
ځانګړتیا | لوړ | منځنی | لوړ |
د PCR حاصلات | منځنی | لوړ | منځنی |
د کشف کچه | لوړ | منځنی | لوړ |
یادښتونه
مهرباني وکړئ اړین PPE واغوندئ، لکه لابراتوار کوټ او دستکشې، ستاسو روغتیا او خوندیتوب ډاډمن کړئ!