RT-LAMP رنګ میټریک ماسټر مکس HCB5204A
دا محصول د عکس العمل بفر، RT-انزایم مکس (Bst DNA پولیمیریز او د تودوخې مقاومت لرونکي ریورس ټرانسکریپټیس)، لیوفیلیز پروټیکټینټونه او د کروموجینک رنګ اجزا لري.د کارولو لپاره، یوازې بفر وکاروئ، د غبرګون انزایم او پریمر مخلوط شوي او ټیمپلیټ ته اضافه شوي؛د لیوفیلیز محافظت اضافه کول مستقیم کیدی شي.دا د lyophilizer او lyophilized سره وصل شوی و، او یوازې پریمر او ټیمپلیټونه اضافه شوي کله چې کارول کیږي.دا کټ د پراخیدنې چټک، روښانه بصری کشف چمتو کوي، کوم چې منفي عکس العمل په سور کې ښودل شوی او مثبت عکس العمل ژیړ ته د بدلون په واسطه ښودل شوی.
اجزا
| اجزا | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| د لوپ منځګړیتوب امپلیفیکیشن بفر (د رنګ سره) | 0.96 ملی لیتر | 4.80 ملی لیتر × 2 | 9.60 ملی لیتر × 10 |
| د RT-انزایمونو مخلوط | 270 μL | 2.70 ملی لیتر | 2.70 ملی لیتر × 10 |
| لیوفیلیز محافظت | 0.96 ملی لیتر × 2 | 9.60 ملی لیتر × 2 | 9.60 ملی لیتر × 20 |
غوښتنلیکونه
د DNA یا RNA isothermal amplification لپاره.
د ذخیره کولو شرایط
د وچ یخ سره لیږدول شوی، په -25 ~ -15℃ کې زیرمه شوی.د بار بار کنګل کیدو څخه ډډه وکړئ، محصول د 12 میاشتو لپاره اعتبار لري.
پروتوکول
1.د عکس العمل بفر د خونې په حرارت کې کارول کیږي.د ټیوب په لنډه توګه وورټیکس یا ټیوب څو ځله بدل کړئ ترڅو په ښه ډول سره مخلوط شي، بیا د تیوب لاندې ته د مایع راټولولو لپاره سینټرفیوج.
2.د غبرګون سیسټم چمتو کول.دا ریجنټ په دوه عکس العمل سیسټمونو کې چمتو کیدی شي ، د مایع عکس العمل مخلوط او لیوفیلیز سیسټم مخلوط.
1) د مایع عکس العمل مخلوط چمتو کړئ
| اجزا | حجم |
| د لوپ منځګړیتوب امپلیفیکیشن بفر (د رنګ سره) | 10 μL |
| د RT-انزایمونو مخلوط | 2.8 μL |
| 10 × پریمر مخلوطa | 5 μL |
| کينډۍ DNA/RNA b | × μL |
| له نیوکلیز څخه پاکې اوبه | تر 50 μL پورې |
2) د Lyophilization سیسټم مخلوط
① lyophilized مخلوط چمتو کړئ
| اجزا | حجم |
| د لوپ منځګړیتوب امپلیفیکیشن بفر (د رنګ سره) | 10 μL |
| لیوفیلیز محافظت | 20 μL |
| د RT-انزایمونو مخلوط | 2.8 μL |
| له نیوکلیز څخه پاکې اوبه | تر 50 μL پورې |
② Lyophilization: چمتو شوی مخلوط په 50μL سیسټم کې lyophilized شوی
③ د عکس العمل مخلوط چمتو کړئ
| اجزا | حجم |
| لیوفیلیز مخلوط | 1 ټوټه |
| 10 × پریمر مخلوطa | 5 μL |
| کينډۍ DNA/RNA b | × μL |
| له نیوکلیز څخه پاکې اوبه | تر 50 μL پورې |
یادونه:
1) یو.10×پرائمر مکس: 16 μM FIP/BIP، 2 μM F3/B3، 4 μM لوپ F/B؛
2) ب.DEPC (د اوبو محلول) د نیوکلیک اسید ټیمپل لپاره توصیه کیږي.
1.د 30-45 دقیقو لپاره په 65 درجې سانتي ګراد کې انکیوب کړئ، کوم چې د رنګ بدلون د غبرګون وخت سره سم په مناسبه توګه غزول کیدی شي.
2.د پټو سترګو له مخې، ژیړ مثبت و او سور منفي و.
یادښتونه
1.مالګه کیدای شي د بفر ټیوب په ښکته برخه کې راښکاره شي، په لنډه توګه وورټیکس یا ټیوبونه څو ځله بدل کړئ ترڅو د خونې په حرارت کې ښه مخلوط شي.
2.د غبرګون تودوخه د پرائمر حالت سره سم د 62 ℃ او 68 ℃ ترمنځ مطلوب کیدی شي.
3.بسته شوي ریجنټونه باید د اوږدې مودې لپاره د هوا سره مخ نشي.
4.د سور او ژیړ رنګ کولو عکس العمل د عکس العمل سیسټم pH بدلون پورې اړه لري، مهرباني وکړئ د Tris nucleic acid ذخیره کولو محلول مه کاروئ، د ddH کارولو سپارښتنه کیږي.2او زیرمه شوي نیوکلیک اسید؛
5.تجربه باید معیاري وي، پشمول د عکس العمل سیسټم چمتو کول، لیوفیلائزیشن، او د نمونې پروسس او د نمونې اضافه کولو پروسې؛
6.د ککړتیا څخه د مخنیوي لپاره، دا سپارښتنه کیږي چې د عکس العمل سیسټم په الټرا پاک بنچ کې چمتو کړئ، په بل ډول د خونې د فوم هود ته ټیمپلیټونه اضافه کړئ ترڅو د غلط مثبت لاسوهنې مخه ونیسي.
