2×PCR سوپر مکس (د رنګ سره)
2× PCR ماسټر مکس د Taq DNA پولیمیریز، dNTPs، او د PCR نور اړین برخې لري.ماسټر مکس د 3 میاشتو لپاره په 4 ℃ کې زموږ د دودیز سټیلیزرونو سره مستحکم دی.د پری مکس حل د دودیز PCR لپاره غوره شوی او د DNA ټیمپلیټ او پریمرونو اضافه کولو سره کارولو ته چمتو دی.د PCR محصولات د مخکینۍ بار شوي بروموفینول نیلي رنګ سره مستقیم د الیکٹروفورسیس لپاره بار کیدی شي.پراخ شوي محصولات 3 '-dA پروټروژن لري او په اسانۍ سره په T ویکتور کې کلون کیدی شي.د 2×PCR ماسټر مکس د PCR طرزالعمل ساده کوي او ککړتیا کموي.
د ذخیره کولو شرایط
محصولات باید د 2 کلونو لپاره -25℃~-15℃ کې زیرمه شي.
مشخصات
وفاداري (بقابله تق) | ۱× |
ګرم پیل | No |
اوورنګ | 3' -ا |
پولیمیریز | تاک DNA پولیمریز |
د عکس العمل بڼه | سوپر مکس یا ماسټر مکس |
د عکس العمل سرعت | معیاري |
د محصول ډول | د PCR ماسټر مکس (2x) |
لارښوونې
1.د غبرګون سیسټم
اجزا | حجم(μL) |
کينډۍ DNA | مناسب |
پریمر 1 (10 μmol/L) | 2 |
پریمر 2 (10 μmol/L) | 2 |
2× PCR ماسټر مکس | 25 |
ddH2O | تر 50 پورې |
2.د پراخولو پروتوکول
د سایکل ګامونه | د تودوخې درجه (°C) | وخت | سایکلونه |
ابتدايي تخریب | 94 | 5 دقیقې | 1 |
له منځه وړل | 94 | 30 ثانیې | 35 |
annealing | 50-60 | 30 ثانیې | |
تمدید | 72 | 30-60 ثانیې/kb | |
وروستی تمدید | 72 | 10 دقیقې | 1 |
یادونه:
1) د کينډۍ کارول: 50-200ng جینومیک DNA؛0.1-10ng پلاسمیډ DNA.
2) Mg2+غلظت: دا محصول د 3mM MgCl2 لري، د ډیری PCR عکس العملونو لپاره مناسب دی.
3) د annealing تودوخه: مهرباني وکړئ د پریمر نظري Tm ارزښت ته مراجعه وکړئ.د انیل کولو تودوخه د پریمر نظري ارزښت څخه 2-5 ℃ ټیټ ته ټاکل کیدی شي.
4) د تمدید وخت: د مالیکولر پیژندنې لپاره، 30 ثانیې / کیلوبایټ سپارښتنه کیږي.د جین کلونینګ لپاره، 60 ثانیې / کیلوبایټ سپارښتنه کیږي.
یادښتونه
1.د PCR محصولات د 2× PCR ماسټر مکس سره د پولی کریلامایډ جیل الیکٹروفورسیس لپاره مناسب ندي.
2.ستاسو د خوندیتوب او روغتیا لپاره، مهرباني وکړئ د عملیاتو لپاره د لابراتوار کوټونه او د ضایع کیدو وړ دستکشې واغوندئ.
3.دا یوازې د څیړنې کارولو لپاره کارول کیږي!