2×PCR ماسټر مکس (پرته له رنګ)
د PCR ماسټر مکس یو ډول دودیز PCR پری مکس محلول دی چې کارولو ته چمتو دی ، پشمول د Taq DNA پولیمریز ، dNTP مکس MgCl2 او مطلوب بفر.د عکس العمل په جریان کې ، یوازې پریمر او ټیمپلیټ د پراخولو لپاره اضافه کیدی شي ، کوم چې د تجربې عملیاتي مرحلې خورا ساده کوي.دا محصول غوره ثبات کونکي لري او د 3 میاشتو لپاره په 4℃ کې زیرمه کیدی شي.د PCR محصول 3′-dA پروټروژن لري او په اسانۍ سره په T ویکتور کې کلون کیدی شي.
د ذخیره کولو شرایط
محصول باید په -25 ℃ ~ -15 ℃ د دوو کلونو لپاره زیرمه شي.
مشخصات
| وفاداري (بقابله تق) | ۱× |
| ګرم پیل | No |
| اوورنګ | 3′-ا |
| پولیمیریز | تاک DNA پولیمریز |
| د عکس العمل بڼه | سوپر مکس یا ماسټر مکس |
| د عکس العمل سرعت | معیاري |
| د محصول ډول | د PCR ماسټر مکس (2×) |
لارښوونې
1.د غبرګون سیسټم
| اجزا | اندازه (μL) |
| کينډۍ DNA | مناسب |
| پریمر 1 (10 μmol/L) | 2 |
| پریمر 2 (10 μmol/L) | 2 |
| د PCR ماسټر مکس | 25 |
| ddH2O | تر 50 پورې |
2.د پراخولو پروتوکول
| د سایکل ګامونه | د تودوخې درجه (°C) | وخت | سایکلونه |
| مخکې له ځنډه | 94 ℃ | ۵ دقیقې | 1 |
| له منځه وړل | 94 ℃ | 30 ثانیې | 35 |
| annealing | 50-60 ℃ | 30 ثانیې | |
| تمدید | 72 ℃ | 30-60sec/kb | |
| وروستی تمدید | 72 ℃ | 10 دقیقې | 1 |
یادونه:
1) د کينډۍ کارول: 50-200 ng genomic DNA;0.1- 10 ng پلاسمیډ DNA.
2) Mg2+غلظت: دا محصول د 3 mM MgCl2 لري د ډیری PCR عکس العملونو لپاره مناسب.
3) د اینیلینګ تودوخې: مهرباني وکړئ د پریمر نظري Tm ارزښت ته مراجعه وکړئ.د انیل کولو تودوخه د پریمر نظري ارزښت څخه 2-5 ℃ ټیټ ته ټاکل کیدی شي.
4) د تمدید وخت: د مالیکولر پیژندنې لپاره، 30 ثانیې / کیبل وړاندیز کیږي.د جین کلونینګ لپاره، 60sec/kb سپارښتنه کیږي.
یادښتونه
1.ستاسو د خوندیتوب او روغتیا لپاره، مهرباني وکړئ د عملیاتو لپاره د لابراتوار کوټونه او د ضایع کیدو وړ دستکشې واغوندئ.
2.یوازې د څیړنې لپاره کارول!
